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elisa试剂盒揭示竞争法的操作步骤
浏览次数:30发布日期:2019-12-25

elisa试剂盒比赛法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原比赛与固相抗体结合,因而结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量成反比。

elisa试剂盒原理

ELISA是以免疫学反应为根底,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可经过洗刷除去多余的游离反应物,然后保证实验成果的特异性与稳定性。在实践使用中,经过不同的设计,具体的方法过程可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原比赛法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。

elisa试剂盒操作过程如下:

(1)将特异抗体与固相载体联接,形成固相抗体。洗刷。

(2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以相同的机会与固相抗体结合,比赛性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量削减。参阅管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达zui充沛的量。洗刷。

(3)加底物显色:参阅管中由于结合的酶标抗原zui多,故色彩zui深。参阅管色彩深度与待测管色彩深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管色彩越淡,表示标本中抗原含量越多。

   

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