金誉彩票

您好,欢迎进入上海丰寿实业有限公司网站!
一键分享网站到:
您现在的位置:首页 >> 技术文章 >> ELISA试剂盒实验结果的准确性
ELISA试剂盒实验结果的准确性
浏览次数:435发布日期:2015-01-12

      在ELISA试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、ELISA试剂盒试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯(聚苯乙烯磺酸钠)凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
 
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)ELISA试剂盒进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
 
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA试剂盒法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
 
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。ELISA试剂盒底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
021-54845833
手机
021--54845833
分享到:QQ空间新浪微博腾讯微博人人网微信

友情链接:天天彩票官网  88彩票注册  88彩票官网  GT彩票平台  幸运彩票开户  金誉彩票开户  金誉彩票  拉菲彩票注册  GT彩票  拉菲彩票开户  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!